伊藤 哲哉

高価で特殊な機器・装置を用いることなく,簡便にDihydropyrimidine dehydrogenese(DPD)欠損の原因となるDPDをコードする遺伝子(DPYD)の多型検出方法を開発した.DPYD遺伝子(全23exon)のコード領域,および,その転写調節領域・スプライス部位全てを含む領域を26個のDNA断片に分割し,それぞれの断片をPCRにより増幅した.各増幅産物はアガロースゲル電気泳動により,単一のバンドとして増幅されているか確認した.半自動SSCPシステムによるDPYD遺伝子多型スクリーニング法を確立した.既知の変異を導入したDNA断片を作製し,既知の多型のうち21種は検出可能であった.最近報告された残りの13種についても今後検討する予定である.確立した半自動SSCPシステムは,従来のSSCPに比較し,多数の有利な点があり,従来のSSCP法の欠点を克服した

Inosine triphosphate pyrophosphohydrolase(ITPase)は,Inosine triphosphate(ITP)をInosine monophosphate(IMP)とピロリン酸に加水分解する酵素で,現在までに,ITPAの遺伝子構造と,白人における5つの変異部位が報告されている.日本人100例を対象とし,ITPaseの酵素活性およびITPA遺伝子における酵素活性に影響を与える2つの変異,94C>A,IVS2+21A>Cの頻度について調査した.さらに,日本人におけるITPase酵素活性と二つの変異との相関について検討した.ITPase活性は二峰性の分布を示した.酵素活性がゼロであった3例は赤血球中に異常なITPの蓄積を伴い,94C>Aのホモであった.酵素活性の低いグループは94C>Aのヘテロであった.酵素活性の分布は94C>Aの遺伝子型と良好な相関を示した.94C>Aの頻度は0.155で,白人の約2.6倍と高値であった.IVS2+21A>Cの変異は日本人には見られなかった

先天代謝異常症の子どもでは,異常な代謝産物が蓄積して種々の発達・発育障害が現れるが,食事療法によって異常な代謝産物の蓄積を防ぐことができる疾患もある.だが,食事療法を実際に行う場合にはいろいろ困難な点も少なくない.子供たちにとっては,友達と違う食事を強いられることは大きな精神的負担になるからである.そこで,こうした問題を踏まえて,食事療法の指導について,その具体的な食事内容なども示しながら,フェニルケトン尿症を中心に紹介した

現在知られている7種のピリミジン代謝異常症について概説した.いずれの疾患も症例数が少なく,また発見されて日の浅いものも多いため今後の症例の蓄積が期待されるが,分解系の酵素欠損症では特異的症状に乏しくまた無症状例も多いため,診断は困難であった.近年,尿中ピリミジン分析の分野でこれまでのHPLC法に加え,高速液体クロマトグラフィー/タンデムマススペクトロメトリー法,ガスクロマトグラフィー/マススペクトロメトリー法を用いた尿中ピリミジン分析法が開発された.特に後者は新生児マス・スクリーニングの新たな手段としても注目されており,検査法の普及と共に更に多くの症例の発見が期待されている

グルタル酸尿症I型及びプロピオン酸血症,ホロカルボキシラーゼ合成酵素欠損症の各症例をフォローアップしている.症例1のグルタル酸尿症I型症は,ポリオワクチン接種を契機に急性脳症を来たし発症した.急性期の代謝性アシドーシスや高アンモニア血症はあまり顕著ではなかった.又,発熱や感染に伴って高CPK血症が繰り返し出現した.症例2は,高アンモニア血症を契機に尿の有機酸分析にてプロピオン酸血症と判明した.新生児期以後の発達は良好であったが,1歳以後ケトアシドーシス発作を繰り返し,徐々に発達の遅れも生じてきており,従来的な食事療法やカルニチン療法のみでは限界を感じている.現在,家族の希望に基づき肝移植を準備中である.症例3は,生後数時間以内に急激な代謝性アシドーシスの進行がみられたホロカルボキシラーゼ欠損症と診断し,CHDFとビオチンの大量投与が著効した

15日男児.マススクリーニングにおける17-OHP高値を主訴とした.17-OHP高値は生後2ヵ月まで遷延したが,その後正常化した偽陽性と思われた.HPLC-RIA法でも17-OHPは高値で胎児副腎由来のステロイド産物の交叉反応による見せかけの17-OHP高値は否定的と考えられた.17-OHP高値であった時にも尿中pregnanetriolは高値であったが,pregnanetrioloneは低値を示し,通常の21-水酸化酵素欠損症患児とは異なる尿中ステロイドプロファイルを認めた.生後早期の段階では,17-OHP高値だけは診断・治療を見誤る可能性があり,慎重に経過観察する必要がある