shiogama kazuya

何事も基本が大事である。病理標本を観察する時も同様、正常を理解しているかどうかで見え方が変わってくる。本稿では、初心者目線で馴染み深い典型例から希少例まで、限られた範囲ではあるが取り揃えてみた。病気になると細胞レベルでどのような変化が起きているのか、比較してみていただきたい。(著者抄録)

Objectives: Fetal human cytomegalovirus (HCMV) infection might be involved in fetal growth restriction (FGR). Maternal serostatus and the prevalence of congenital HCMV infection are affected by various factors, such as socioeconomic status and ethnicity. Therefore, the prevalence of congenital HCMV-related FGR should be examined in each region. Methods: Seventy-eight cases of FGR with delivery between January 2012 and January 2017 at Fujita Health University Hospital were studied. Twenty-one non-FGR cases were also included as a control group. Placental sections obtained from the FGR and control cases were immunostained with two primary antibodies for detecting immediate early antigens. Results: Nineteen placental samples from FGR cases with another etiology were excluded. Finally, 59 placental samples from FGR cases of unknown etiology were included in the pathological analysis. Four of 59 (6.8%) placental samples were positive for HCMV antigen. All four positive cases were stained with the M0854 antibody, and cases showed positivity for the MAB 810R antibody. Neither maternal nor infantile clinical features were different between the HCMV-positive and -negative FGR cases. A pathological examination showed a hematoma in three of four cases and infarction in two of four cases. Conclusions: HCMV antigen was detected in 6.8% of placental samples obtained from FGR cases without an obvious etiology. No remarkable maternal or neonatal clinical features discriminated HCMV-related FGR from FGR due to other causes. Vasculitis and inflammation might play important roles in the pathogenesis of HCMV-related FGR.

Butlerov氏が1859年にホルムアルデヒドを報告して以来、これまでに数々の固定液が考案されてきた。固定は検体処理における最重要操作であり、固定の原理、固定液の種類やそれぞれの特徴を理解しておかなければならない。病理検体は繰り返し採取できないため、失敗が許されない。そのことを念頭において、日頃から適切な固定操作を心がける必要がある。(著者抄録)

アポトーシス関連蛋白の免疫染色は、特異的、簡便かつ高感度にアポトーシス細胞を同定、アポトーシス実行経路を評価できる優れたアポトーシス証明法である。ただし、再現性と正確性の高い免疫染色を実施するためには、染色実施に先立って、使用する抗体ごとにあらかじめ最適な抗原性賦活化法および検出法を選択することが極めて重要である。cleaved caspase-3は最も汎用性が高いcaspase依存性アポトーシスのマーカーである。cleaved lamin-A、cleaved cytokeratin-18、cleaved actin、cleaved vimentinをターゲットとした免疫染色ではcaspase-3や-6による切断産物を証明できる。γH2A.XはDNA二本鎖切断のマーカーとなる。cleaved caspase-8、cleaved caspase-9、cleaved Bidは、それぞれデス・レセプター経路、ミトコンドリア経路、レセプター経路からミトコンドリア経路への変換のマーカーとして有効と考えられる。一方、apoptosis-inducing factorの核内局在はcaspase非依存性アポトーシスのマーカーとなる。病理組織診断のために作製されたパラフィンブロックからの組織切片を利用して、背景の組織像を把握しながら、特定物質を発現する細胞の種類を見極めることができる免疫染色の利点を生かし、幅広い分野へのアプローチが期待される。(著者抄録)

アポトーシスを組織化学的に検出する試みは従来、ヌクレオソーム単位の断片化されたDNAを検出するterminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate-biotin nick end labeling(TUNEL)法や、in situ nick translation(ISNT)法が主流であった。しかし、ホルマリン固定パラフィン切片を対象とする場合、固定時間や核酸露出処理などの条件により検出感度の低下や再現性の欠如が認められる。これに代わって注目されているのが、アポトーシスシグナル伝達経路で限定分解された分子に対する特異抗体を用いた免疫染色である。この手法は、通常の免疫染色と同様、簡便で再現性にも優れており、今後のアポトーシス研究への応用が期待される。(著者抄録)